Российские ученые разработали простую и легко воспроизводимую систему маркировки отдельных клеток, основанную на фотопереключаемых капсулах с углеродными наноточками и красителем. Метод позволяет отслеживать поведение и перемещение отдельных клеток с максимальной точностью. Статья опубликована в журнале ACS Applied Materials and Interfaces.
Ученым часто приходится прослеживать движение отдельных клеток, например для выделения максимально очищенных клеток из различных типов клеточных линий или для выявления паразитов. Один из способов решения этой задачи — использование флуоресцентных белков, светящихся под воздействием ультрафиолетового или синего света. Однако применение этого метода требует создания новых трансгенных линий, обеспечивающих экспрессию этих белков и при этом удаляющихся от исходных клеточных культур. Кроме того, некоторые белки токсичны и быстро разлагаются.
Ученые из Сколтеха и Саратовского государственного университета использовали вместо маркерных белков полимерные многослойные микрокапсулы, которые усваиваются клетками и остаются внутри на протяжении нескольких дней. Ученые изготовили гибридную полимерную микрокапсулу с углеродными наноточками, наполненную флуоресцентным красителем — родамином B.
Авторы протестировали систему, промаркировав отдельные клетки на шести клеточных линиях. Система показала неплохой результат при тестировании: метки сохранялись даже после 48 часов наблюдения, а в маркированных клетках заметных повреждений отмечено не было.
«Для оптической маркировки отдельных клеток ранее использовались другие методы, однако все они основывались на генетической модификации клеток и кодировании фотопереключаемых белков, что не позволяло широко применять их на практике, особенно для стволовых и других клеток, генетическая модификация которых невозможна или нежелательна. Мы предложили простой инструмент, который можно применять для различных клеточных линий благодаря легкому усваиванию фотопереключаемых капсул клеткой. Еще одно преимущество метода — возможность комбинаторной маркировки: каждая маркированная клетка может иметь уникальную комбинацию переключаемых капсул, которая “присваивает код” отдельным клеткам и облегчает задачу мониторинга перемещений клеток внутри популяции», — рассказывает руководитель исследования Глеб Сухоруков.
Подписывайтесь на InScience.News в социальных сетях: ВКонтакте, Telegram, Одноклассники.
